抗透明带抗体抗精子抗体与不孕及反复自然流产的研究

井冈山医专学报

ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＪＩＮＧＧＡＮＧＳＨＡＮＭＥＤＩＣＡＬＣＯＬＬＥＧＥＶｏｌ．１５Ｎｏ．４Ｊｕｌ．２００８

抗透明带抗体抗精子抗体与不孕及反复自然流产的研究

张

敏

郯城

（郯城县计划生育服务站，山东

２７６１００）

［摘要］目的探讨抗透明带抗体（ＺＰＡｂ）和抗精子抗体（ＡｓＡｂ）对女性不孕及反复自然流产的影响。方法对原发性不孕４９人，继发性不孕２９人，原发性自然流产３９人，继发性自然流产３１人，用ＥＬＩＳＡ方法检测其血清中ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ，与３５例健康妇女对照。结果对照组ＡｓＡｂ阳性率为５．７１％（２／３５），ＺＰＡｂ阳性率为２．８６％（１／３５），原发性不孕组与继发性不孕组ＡｓＡｂ阳性率分别为３０．６１％（１５／４９）和２７．５９％（８／２９），ＺＰＡｂ阳性率分别为２４．４９％（１２／４９）和２４．１３％（７／２９），与对照组比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。原发性自然流产组ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ阳性率分别为２８．２１％（１１／３９）和２３．０８％（９／３９），与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；而继发性流产组中ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ阳性率分别为６．４５％（２／３１）和３．２３％（１／３１），与对照组比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；原发性流产组与继发性流产组间ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ的阳性率也有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ在导致原发性和

继发性不孕方面均有明显影响；对原发性流产的发生有明显作用，而对继发性流产的影响意义不大。检测

ＡｓＡｂ、ＺＰＡｂ可作为不孕及原发性流产病因诊断的一项指标，干涉其高血清浓度可望对这类疾病起到治疗作用。［关键词］不孕症；自然流产；病因学；抗精子抗体；抗透明带抗体［中图分类号］Ｒ７１１．６［文献标识码］Ａ［文章编号］１００８－２７３５（２００８）０４－００１０－０２

免疫性不孕约占女性不孕的１０％左右，自身抗体的产生是其重要原因之一。反复自然流产（Ｒｅ－ｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ解ａｂｏｒｔｉｏｎｎ，ＲＳＡ）是一种常见妊娠并发症，其病因除与遗传、

剖、内分泌因素有关外，４０％～６５％与免疫因素有关［１］。为探讨不孕及ＲＳＡ妇女与自身抗体的关系，从２０００年３月至２００１年１０月我站对此两类患者血清中的抗精子抗体（ＡｓＡｂ）及抗透明带抗体（ＺＰＡｂ）进行了检测，现将结果报告如下。

表２ＲＳＡ病人血清ＡｓＡｂ、ＺＰＡｂ阳性表达情况

ｎ

ＡｓＡｂ２（５．７１）１１（２８．２１）２（６．４５）

３５３９３１

（ｎ，％）

ＺＰＡｂ

正常对照组原发性不孕继发性不孕

１（２．８６）９（２３．０８）１（３．２３）

与正常生育组比较，Ｐ＜０．０５与原发组比较，Ｐ＜０．０５３

３讨论

近年来随着生殖免疫学的发展，人们开始认识到免疫因

１

１．１

资料和方法

一般资料

不孕组：７８例，其中原发性不孕４９例，继发性

素可引起不孕及ＲＳＡ，并推论这些妇女可能有潜在的或早期的自身免疫失调。本研究结果也从一定侧面反映了自身抗体与不孕及ＲＳＡ的关系。

精子对女性是同种异体免疫抗原，由于女性生殖道存在着天然解剖屏障，同时又存在粘膜相关免疫系统，所以正常情况下不会发生对精子的免疫反应和产生抗体。当外伤、感染、物理和化学等因素造成女性生殖道的生理屏障破坏时，大量精子会通过淋巴进入血液循环，导致免疫反应并产生ＡｓＡｂ。活化及获能，影响ＡｓＡｂ可干扰精子在女性生殖道中的代谢、

精子与卵细胞透明带结合及顶体反应；同时结合有免疫球蛋白的精子，在通过宫颈粘液时，粘液和免疫球蛋白分子间相互作用，会阻碍精子的通过［２］，导致不孕。本研究中原发不孕组与继发不孕组的ＡｓＡｂ阳性率均明显高于正常对照组，但两组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５），说明ＡｓＡｂ在导致原发或继发性不孕方面均有较重要的作用。ＲＳＡ与ＡｓＡｂ是否有关众说不一。流产。Ｈａｓｓ等［４］认为ＡｓＡｂ能干扰受精卵的植入而导致吸收、

Ｗｉｔｋｉｎ等［５］报道了习惯性流产妇女血清ＡｓＡｂ阳性率为３６．４％。也有人认为ＡｓＡｂ阳性与阴性妇女的流产率无明显差异［３］。本研究的结果表明，原发性流产妇女中，血清中ＡｓＡｂ阳性率明显高于正常对照组和继发性流产组，且原发组与继发组在统计学上有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。可能的原因是女性体内ＡｓＡｂ在受精卵着床以后主要作用于滋养层细胞［４］，妊娠８５ｄ前正是胚胎发育吸收滋养层营养的时期，如受到ＡｓＡｂ干扰便可能导致流产。而到了孕中期以后，妊娠内环境相对稳定，ＡｓＡｂ的影

不孕２９例，不孕史均在２年以上，且经多次就诊，均经过妇科检查、基础体温测定、输卵管通液术或造影术，除外生殖器Ｂ超、器质性病变。ＲＳＡ组：７０例，均为连续发生２次或２次以上的自然流产者，其中任何１次流产发生在２０孕周以上者为继发性流产，共３１例，否则为原发性流产，共３９例，均经过以上检查，无染色体异常，无内分泌病变。对照组：非妊娠期已生育健生育史，无血液病史及遗传病史。康妇女３５例，无异常妊娠、

１．２标本采集受试者均抽取空腹静脉血３ｍＬ，离心后，分

离血清，于－２０℃以下冷冻保存，待测。

１．３检测方法采用双抗夹心酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）。ＡｓＡｂ、ＺＰＡｂ试剂盒由济南贝西生物技术有限公司提供。

２

检验，当某一１．４统计学处理各组间阳性率的比较，用χ

２

值＜５时，用校正χ检验。

２结果

ＡｓＡｂ、ＺＰＡｂ在原发性不孕和继发性不孕及原发性流产和继发性流产中的阳性率见表１、表２。表１不孕症病人血清ＡｓＡｂ、ＺＰＡｂ阳性表达情况（ｎ，％）

ｎ正常对照组３５原发性不孕４９继发性不孕２９

与正常生育组比较，Ｐ＜０．０５收稿日期：２００８－０５－２６

ＡｓＡｂ２（５．７１）１５（３０．６１）８（２７．５９）ＺＰＡｂ１（２．８６）１２（２４．４９）７（２４．１３）

第１５卷第４期张敏：抗透明带抗体抗精子抗体与不孕及反复自然流产的研究

响会明显减弱，一般不会导致２０周以后的流产（继发性流产）。

透明带（ＺＰ）是被覆在哺乳动物卵母细胞表面的一层明胶样糖蛋白基质，主要由３种糖蛋白组成［６］。动物实验已证实，ＺＰ具有强免疫原性，可诱发同种或异种免疫应答，产生抗透明带抗体（ＺＰＡｂ）。ＺＰＡｂ与ＺＰ结合，可干扰卵泡和卵细胞间的信息交流，掩盖ＺＰ上的特异性精子受体，使卵子失去与同种精子结合的能力。同时ＺＰＡｂ使ＺＰ的结构加固，即使发生受精，受着床。Ｋａｍａｄａ等［７］精卵也被包裹在坚固的ＺＰ内，而不能脱壳、

采用被动血凝反应法（ＦＨＡＲ）检测不孕妇女血清中抗卵透明带抗体活性，检出率明显高于对照人群。本研究对不明原因不孕妇女的分析发现，原发性不孕组血清中ＺＰＡｂ阳性率为２４．４９％，继发性不孕组ＺＰＡｂ阳性率为２４．１３％，与正常生育组（阳性率为２．８６％）比较均有显著性差异。ＺＰＡｂ可诱发ＲＳＡ的重要免疫学病因是：透明带自身抗体可引起母胎免疫识别过度，主要为自身免疫异常，增加了母体对胎儿胎盘的免疫损伤作用，加速了对胚胎的免疫排斥反应，加之ＺＰＡｂ对含透明带的孕卵的直接损伤作用，使孕卵即使着床也因前期的损伤作用而不能正常发育［８］。本研究中原发性ＲＳＡ组ＺＰＡｂ的阳性率为２３．０８％，明显高于正常生育组的２．８６％（Ｐ＜０．０５）和继发组的３．２３％（Ｐ＜

原发性流产的原因之一，检测这两项指标并做针对性处理，对诊断和治疗女性不孕及原发性流产有着较为重要的意义。参考文献

０．０５）。而继发性ＲＳＡ组中ＺＰＡｂ阳性率与正常对照组间无显

著性差异（Ｐ＜０．０５），表明ＺＰＡｂ所引起的ＲＳＡ以原发性为主。

总之，免疫性因素对女性不孕及ＲＳＡ有着重要的作用。

成熟、排卵、受精、受精卵着ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ可以干扰卵的发育、

床、胚胎发育成熟等过程，使女性生育力下降。它们均对原发性不孕、继发性不孕和原发性ＲＳＡ有明显作用，而对继发性ＲＳＡ影响不大。高血清ＡｓＡｂ和ＺＰＡｂ可能是某些妇女不孕及

［１］ＣｏｕｌａｍＣＢＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｏｆｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｍＪＲｅｐｒｏｄＩｍｍｕｎｏｌ，１９９１，２６：２３－２６．

［２］何亚平，罗自强，徐崇．高分子聚合物ＨＦＭＣ注入兔输精管后搞精子自身免疫的研究［Ｊ］．华西医大学报，１９９１，２２（４）：３８４－３８６．

［３］ＭｅｎｇｅＡＣ．Ｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅａｎｄｉｎｆｌｕｅｎｃｅ．ｏｆａｎｔｉｓｐｅｒｍａｎｔｂｏｄ－ｉｅｓｉｎｉｎｆｅｒｔｉｌｅ．ｈｕｍａｎｃｏｕｐｌｅｓｏｎｓｐｅｒｍｅｒｖｉｃａｌｍｕｃｕｓｉｎ－ｔｅｒａｃｔｉｏｎｓａｎｄｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙｆｅｒｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉｌｓｔｅｒｉｌ，１９８８，３８：４３９－４４３．

［４］ＨａｓｓＧＧｊｒ．ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇａｎｔｉｓｐｅｒｍａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎｒｅｃｕｒｒｅｎｔａｂｏｒｔｉｏｎｗｏｍｅｎ［Ｊ］．Ｆｅｒｔｉｌｓｔｅｒｉｌ，１９８６，４５：２０９－２１３．

［５］ｗｉｔｋｉｎＳＳ．ＤａｖｉｄＳＳ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓｐｅｒｍ．ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｏｎｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｉｎｓｕｂｆｅｒｔｉｌｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｍＪｏｂｓｔｅｒ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．１９８８，１５８：５９－６６．

［６］ＤｕｍｂａｒＢｓＡｖｅｒｙｓ，ｌｅｅＶ，ｅｔａｌＴｈｅ．ｍａｍｍａｌｉａｎｚｏｎｅｐｅｌｌｕ－ｃｉｄａ：ｉｔｓｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．ＲｅｐｒｏｄＦｅｒｔｉｌＤｅｖ．１９９４，６：５９－６５．

［７］Ｋａｍａｄａ．Ｍ，ＤａｔｉｏｎＪ，ＭｏｒｉＫ，ｅｔａｌ．Ｅｔｉｏｌｏｇｉｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａｕｔｏａｎｉｔｉｂｏｄｉｅｓｔｏｚｏｎａｐｅｌｌｕｃｉｄａｉｎｈｕｍａｎｍａｌｅｉｕｆｅｒｔｉｌｉ－ｔｙ［Ｊ］．ＡｍＪＲｅｐｒｏｄＩ，ｍｍｕｎｏｌ，１９９２，２８：１０４－１１０．

［８］ＭｃｌｎｙｒｅＪＡ，ｃｏｕｌａｍＯＢ，ＦａｕｌｋＷＰ．Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｍＪＲｅｐｒｏｄＩ，ｍｍｕｎｏｌ，１９８９，２１：１００－１０４．

ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＺＰＡｂａｎｄＡｓＡｂｏｎｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ

ａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｉｖｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ

ＺＨＡＮＧＭｉｎ

（ＴｈｅＢｉｒｔｈＣｏｎｔｒｏｌＤｉｒｅｃｔｉｎｇＳｔａｔｉｏｎｏｆＴａｎｃｈｅｎｇ，Ｔａｎｃｈｅｎｇ２７６１００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＺＰＡｂａｎｄＡｓＡｂｏｎｆｅｍａｌｅｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ（ＲＳＡ）．Ｍｅｔｈ－ｏｄｓ：ＡｓＡｂａｎｄＡＰＡｂｉｎｓｅｒｕｍｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈ．ＥＬＩＳＡｉｎ４９ｃａｓｅｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ，２９ｃａｓｅｓｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．３９ｃａｓ－ｅｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎａｎｄ３１ｃａｓｅｓｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｙ．ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｗｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｏｆ３５ｈｅａｌｔｈｗｏｍｅｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡｓＡｂＺＰＡｂｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅ５．７１％（２／３５）ａｎｄ２．８６％（１／３５）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡｓＡｂｉｎｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐｗｅｒｅ３０．６１％（１５／４９）ａｎｄ２７．５９（８／２９）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＷｈｉｌｅｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＺＰＡｂｉｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅ２４．４９％（１２／４９）ａｎｄ２４．１３（７／２９）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．，ａｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡｓＡｂａｎｄＺＰＡｂｉｎｔｈｅｐｒｉｍａｒｙ．ｓｐｏｎｔａｎｃｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅ２８．２１（１１／３９）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｂｏｔｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）ｗｈｉｌｅｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡｓＡｂａｎｄＺＰＡｂｗｅｒｅ６．４５％（２／３１）ａｎｄ３．２３（１／３１）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎｇｒｏｕｐｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡｓＡｂａｎｄＺＰＡｂｉｎｔｈｅｐｒｉｍａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎｇｒｏｕｐａｎｄｓｅｃｏｎｄａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｆｏｕｎｄｔｏｂｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｅａｃｈｏｔｈｅｒ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＡｓＡｂａｎｄＺＰＡｂｂｏｔｈｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｐｒｉｍａｒｙａｎｄｓｅｃｏｎｄａｒｙｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．Ｔｈｅｙｈａｄｏｂｖｉｏｕｓｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｏｃｃｕｒ－ｒｅｎｃｅｏｆｐｒｉｍａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎ，ｂｕｔｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈａｔｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎ．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＺＰＡｂａｎｄＡｓＡｂｃａｎｈｅｌｐｔｏｍａｋｅｅｔｉｌｏｇｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｅｓ，ａｎｄｒｅｄｕｃｉｎｇｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｍｃａｎｈｅｌｐｔｏｔｒｅａｔｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙａｎｄｐｒｉｍａｒｙａｂｏｒｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙlｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎlｅｔｉｏｌｏｇｙlＡｓＡｂlＺＰＡｂ

（责任校对：罗辉）