响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究

（广西 特植

，熊雅兰，邹蓉，熊忠臣，蒋运生*，广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所，广西桂林54706）与恢复生态学

摘要［目+］优化多穗石柯总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性的研究。［方法］运用单因素和响应面试验相结合，通过超声波辅助对

其总黄酮的 优化,,用响应面分析法考察料P比、 度、 间对其总黄酮含量的（响，并 氧 性分析。［结果］多穗石柯总黄 为超声 308. 8 W、超声 35kHz、乙醇浓度60%、料P比1 ：41. 2（/：mL）、 度63.21、提取间37.8 min,总黄 为7.7%。抗氧化活性 结果表明，当黄酮浓度为2 m/mL时，对• OH、DPPH •和O2--的最大清除率为7.70%、75.86%和33. 00%,并具有很好的还原能力。［结论］通 剂 声波 法 穗石柯中的黄酮类 -丿 间短、要求温度低、7 ，方法简单 ，具有明显的优｝。该 采用响应面法-定该方法的 工艺，以7为多穗石柯 及开 天 氧化剂 论 。关键词多穗石柯;响应面法；总黄酮;提取工艺；优化;抗氧化活性中图分类号R284 文献标识码A文章编号 057-667（2220）01-071-05doi： 7. 3969/j. isst 05 7-66 7.2222. 01. 055

开放科学（资源服务）标识码（OSD）:Optimization of Extroction Procest and Antioxidani ActivOy of Total Flavonoidt from Lithocuruus polysthcUyrus Rehd by Response Surface MethodologyTANG Jian-mid, ZHU Cheny-hao, GAO Li-mei eh al ( Guanaei Key LaSoratoo of Karst Plant Couservatiou ang Restoratiou Ecolo/y,

Guan/ei Institute of Botany, Chinese AcaSemy of Sciences, Guannei Zhuana Autouomoes Reyiou , Guidn,Guan/ei 541706)Abstroct [ Objective - To optimize the extractiou process ang antioxidant activity of totat flavouoids from Lithocarpus polycchyrus. [ MethoU ]The combinatiou of sinole factor ang respouse surface test was used to optimize the extractiou of totat navouoids bs ultrasouic assist, the edects

of soUdLiquid ratio, extractiou temperature and extractiou time ou the coutent of totat aavouoids were igvestiaated by respouse surface analysis, ang the antioxidant activity was analyzed. [ Result] The optimal oxtractiou cougitious of totat flavouoids from Lithocauus polystacuyus were uS- trasouie power 322. 0 W, ultrasouic frequench 35 kHz, ethanol 0/(0x1:0110/ 60%, so/ULiquid ratio 1 41. 2(/：mL) , extractiou temperature 63. 0 t , extractiou. A- time 35. 0 min , the flavo/oid yielU was 17. 7%. The results of antioxidant actm/y test showed that when the co/cec-

tratiou of flavouoids was 2 m/mL , the maximum clearance rates of • OH , DPPH • and O2 • were 7. 75% , 75. 86% and 32. 00% , re-

spectiveU , and haS /oo/ redecina anilith. [ Couclusiou ] Ultrasouic assisted extractiou with hot soUect extractiou is a simpte and edective meth- oU for extractiou of flavouoids from Lithocaruus polystacuyus. In this stuUy , the respouse surface metho/ is used to deteenine the o/timat ex­

tractiou process of this metho/ , so as to provide theoreticat basis for the industrializatiou and the deveUpmedt of new naturat antioxidants.

Key words Lithocuuus poUshcuynis Redh ； Respouse suUace metho/ ； Total flavouoids ； Extractiou process ； Optimizatiou ； Antioxidant activitu多穗石柯（LLhocarpus polystacuyus Redd ）,别名甜茶、甘 1材料与方法1.1试材 多穗石柯样品227年7月采自于广西植物研 究所 特植，取其完整、烘干、粉碎后过60目筛 备用。样品经广西植物研究所蒋运生研究员鉴定。1.2仪器与试剂TU-1761型双光束紫外可见分光光度计

茶、多 或甜叶子树, 科石柯属常 饮品，药食

，主要分布长江以

甘、性平，具

省区的低山

、化痰、安

中［7。多穗石柯是植一;其味统悠久的民族中药

压、补肾益阴等功效。，甘甜可口，是 宾作为民间茶饮，其茶液金黄，气 （北京 通用 限责任公司）；DL-722E智能超声波;客的至上饮品，是人类追求具 、糖、药3种功能的理想饮料，具有巨大的开发前景3」。现代医学研究发现，多穗石柯

电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。芦丁标准 品（批号:MUST- 17649322,中国药品生物制品检定所）；乙、

中含有丰富的 类、三帖类、多酚类等物质，具 化、钠、硝酸铝、氢氧化钠、铁氤化钾、

、PBS均为分一生物有限公司。液、降血压、降血糖、抗过敏等药理作用。鉴

类提取

多穗石柯总三氯、三氯化铁、邻苯三酚、邻 试剂,

化研究 取工艺，通

, 用一种 理取.对的试验设计方法一面法°6,优化超声

1.3试验方法

1.2.2标准曲线的绘制。精密称取真空干燥至恒重的芦丁

多穗石柯总 量

面法对多穗石柯总测定,确定最 取工艺并利用其总黄酮标准品22 m/，乙醇溶 0. 4 m//mL的对照品溶液。分抗氧化活性,从而为其进一步开发利用提供科学依据。基金项目中央引导｛方科技发展专项（桂科ZY1749617）；广西科技

和人才专项（桂科AD17129022）；广西植 本务费（桂植业18612,桂植业18014,19002）；河池市科技攻 关项*（河科AB 1 98805）。作者简介 唐健民（788—）,男，广西桂林人，助理研究员，硕士，从事

药用植物学和保护生物学研究。*通信作者，研究员，从事 药用植物学和保护生物学研究。收稿日期2019-08-7别取制备好的对照品溶液0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、7 0 mL 及提取液1mL,置于25 mL容量瓶中;加50%乙醇至7 mL,

加5%亚硝酸钠1 mL,混匀，静置6 min；加7%硝酸铝溶液

1 mL,混匀,静置6 min；加4%氢氧化钠溶液17 mL,,0%乙醇

调至刻度，混匀，得空白液、对照品溶液 作为测定波长。以吸光度为纵坐标、总 制回归曲线，回归方程为y = 0. 223 8-*品 液;静置7 min后在176-900 nm处进行光谱扫描，确定选用57 nm

浓 横坐2 002 8 （用=10安徽农业科学2020 年9 099 0)，总黄酮浓度在6. 061 3〜6. 61 6数归mL线性关系

。1.3.3体外抗氧化活性试验。1.3. 33 对• OH的清除作用。试管中加入1 mL 6. 75 mol/L 邻二氮菲、2 mL pH = 5. 45 PBS溶液、1 mL蒸憎水4 mL

6.75 mmol/L F示O4溶液、1 mL 6. 61%H2O0,充分混匀后于

35 t下恒温水浴1 ho 536 nm处测定其吸光度占;用1 mL

1.3.2供试品溶液的制备。称取样品粉末6. 6 g,按照料液 比为1 ：4& 6加16%乙醇24. 6 mL,61.0 t水浴提取20 min, 超声波频率为35 kHz,超声波功率为409. 6 W，提取结束后过

滤，洗涤液合并，定容至57 mL,即得供试品溶液。水代替比。7,测定其吸光度人；用1 mL样液代替1 mL水, 测定其吸光度A[1]o根据公式⑵计算对• OH的清除率。 以V作对照。c1.3.3总黄酮提取工艺优化试验。1.3.3. 3单因素试验。(6超声频率对总黄酮提取率的影响。准确称取2.0 g

•OH 清除率=(&-£)/(人-£)x16%

表”响应面试验的因素与水平Table 1 Factors and levels of responso sprfacr OsO(2)样品粉末，按照料液比1 ：26(归数L)加入52%乙醇1 mL,

40 t水浴中提取39理穗超声功率为156 W,超声频率分别

为高频(61 kHz)和低频(35 kHz),过滤，定容至52数L,取

1 mL至25 mL容量瓶中。(2) 超声功率 总 取率的 。 称取 品粉

末6. 5 g,按料液比1 ：0加入52%乙醇1 mL,40 t水浴中提 取39理穗超声功率分别为66、)6、306、420、549 W,超声频 率为高频(61 kHz)，过滤，定容至52 mL,按照“1. 3.1”步骤加

样，测定吸光度，计算总黄酮含量。(3) 提取温度对总黄酮提取率的影响。准确称取样品粉

末6. 5 g,按料液比1 ：0加入52%乙醇1数L,分别在36、56、

66152159 t水浴中提取39理穗超声功率为420 W,超声频

率为高频(61 kHz)，过滤，定容至52 mL,按照“1. 3.1”步骤加

样，测定吸光度，计算总黄酮含量。(4) 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响。准确称取样品粉

末6. 6 g,按料液比1 ：0:分别加入20%、40%、66%、80%、

16%乙醇1 mL,在66 t水浴中提取36理穗超声功率为 420 W,超声频率为高频(61 kHz)，过滤,定容至56 mL,按照

“1. 3.1”步骤加样，测定吸光度，计算总黄酮含量。(5) 料液比对总黄酮提取率的影响。准确称取样品粉末

6. 5 n分别按料液比 1 ：20、4 ：39 1、：49、4 ：52、4 ：6:加入)6%

乙醇)6 mL,在66 t水浴中提取39 min,超声功率为426 W, 超声频率为高频(61 kHz)，过滤,定容至56数L,按照“1.3.1”

步骤加样,测定吸光度，计算总黄酮含量。(6) 提取时间对总黄酮提取率的影响。准确称取样品粉

末2. 6 g,按料液比1 ：0 :加入16%乙醇1 mL,在66 t水浴 中分别提取11 3916659 1 10理穗超声功率为426 W,超声 频率为高频(61 kHz)，过滤，定容至1数L,按照“1.3.1”步骤 加样,测定吸光度，计算总黄酮含量。1.3.3.3总黄酮提取率的计算方法。其计算公式为：提取率=(CxP)/Mxl96 %

(1)式中,C为提取液中总黄酮的含量(m归数L) ； V为提取液体积

(数L),M为样品粉末质量(n//±。1.3. 3. 3响应面分析。采用Design Exped 8. 6. 6软件设计 响应面试验。根据Bop-BeXnUen的中心组合试验设计原理,

从单因素试验中选取对提取结果影响比较大的4个因素(料 液比、超声功率、提取温度、提取时间)为自变量，总黄酮提取 率为响应值，共计29个试验点进行组合试验°)-(。因素与 水平见表6因素Factor水平LevelA（料液比）B （超声功率）校提取温度）D（提取时间）Solik-liquik

Ultrasonic Extraction Extraction ratiopowerUWtemperature//ttioe//mik-11：3018057101：40300603011：574207601.3. 4.2对 DPPH •的 除 用。浓 的 液与

DPPH溶液等体积混合,39理o后用无水乙醇作参比，在

515 nm处测定其吸光度儿,测定不同浓度的样液与无水乙

醇等体积混合液的吸光度£ ；DPPH溶液与无水乙醇等体积

混合液的吸光度人，取3次平行试验结果根据下列公式计算 对DPPH •的清除率™。以Vc作对照。DPPH •清除率=[£-(£-£)]/£x16%

(3)1.3.4.3 对 O「的清除作用。取 5 mL 6. 05 moOL、pH =&2

的Tds-HCL缓冲液25 t水浴预热20理n,分别加入1 mL样

液、6. 6 mL 25 mmol/L的邻苯三酚,混匀后25 t水浴准确反

应4理穗立即加入2滴8 mol/L HCt终止反应。299 nm处测 定吸光度£,空白对照组的吸光度£。将邻苯三酚溶液用

6. 6 mL蒸憎水代替，得到吸光度£。取3次平行试验结果

根据下列公式计算对。7- •的清除率。以Vc作对照°4。OJ •清除率=[£-(£-£) ]/£x12%

(4)1.3.4.4总还原力的测定。1.6mL样液加入0. 6 mL的1% 铁氤化钾溶液和0. 6 mL的6. 22 mol/L磷酸盐缓冲液，混合

均匀后于52 t水浴中反应39理穗迅速冷却加入1%三氯 乙酸0. 5 mL,在4 606 r/mio下离心1理穗 最后取0. 6 mL

上清液，加2.0 mL蒸憎水和0. 6 mL 6. 1%三氯化铁溶液，混 匀后静置19数V测定706 nm处的吸光度°6(。以Vc作对照。

2结果与分析2.1单因素试验2.1.1提取温度的选择。由图1可见，随着温度的升高总 黄酮的提取率先增加后降低，在66 t时，总黄酮提取率达峰

值(15. 3%)。继续升高温度,总黄酮提取率逐渐降低，高温

条件下,致使黄酮类化合物的结构被破坏或影响其析出,导 致总黄酮提取率降低。按照单因素试验结果选择，应以

66t为宜。2.1.2乙醇浓度的选择。由图2可知，在乙醇单因素条件44卷1期唐健民等 响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究142所提取的总黄酮提取率为7.86%。继续增大超声功率，总

取率开始

。

超声功率的 导致了总Efect of extroction temperoture on extroction rate of 4 tai aavonoide下,随着乙醇浓度的增加，总黄酮的提取率先升高后降低。 在乙醇浓 66%的条件下，所提取总

取率 最高Fiy. 2 Effect of lutosonic poweo on extraction rote of total ra-

vonoide值(7. 58% )。随着浓度增加，致使脂溶性杂质增加,抑制了 总黄酮的浸出，逐渐降低了其提取率，因此选择66%的乙醇 浓

2.1.2提取时间的确定。由图5可知，在17~33 min内总黄 酮提取率随着时间的增加而增大，在3。min总黄酮提取率达

取溶剂。到最高值(17. 05%)o随着时间继续增加总黄酮提取率开始，可能是因为长时间使

类化 的结 破坏或粉末溶出其他杂质，使得总 取率。 证总

的提取率以

14 r小提取周期，以3。min为宜。乙醇浓度 Ethanol concentration II %图2乙醇浓度对总黄酮提取率的影响Efet of ethanol concexhohon on extroction rate of totalaavonoide100

20

40 60 80 100 1202.1.3料液比的确定。由图3可知，随着料液比的增多，总 黄酮的提取率 总 率

提取时间 Extraction time II min图5提取时间对总黄酮提取率的影响Fiy. 5 Elect of extroction time on extraction rote of total ra-

vonoide后 。在料液比1 ：50处，所提取的取率达7. 62%。继 料液比后，总 取甚至明显降低，且继 收，所以

溶剂量 费溶剂又料液比140为宜。2.1.6超声频率的选择。经分析，当超声频率为低频

(35kHz)时，总

的提取率要优于高频(61kHz),达17. 85%o所以在超声辅助提取时选用低频(35 kHz)!2.2响应面试验2.2.1响应面正交试验。根据表1设定的水平和因素，共

设29-

试验条件的总

，其中24- ,5个为零点。得 个取率,试验结果见表2o由OU/ 227软件分析得到回归方程为：7= 17. 7 +1:20

1:30 1:40 1:50 1:600. 6339+6. 069B+0. I7C+0. I1D-0. 648B+6. 26AC-0. 635AD-0. 04BC + 0. 028BD - 0. 04CD - 0. HA2 - 0. 7B2 - 0. 24C2 -0. 17D2,其中『为总黄酮含量的预测值。该模型的预测复相

料液比 Sol id-liquid ratio图3料液比对总黄酮提取率的影响Fiy. 2 Efet of soOdhiquid rotio on extroction rate of total ra-

vonoide关系数疋=0.084 5,矫正系数Adj R2 = 0. 966 4,说明试验的预测值拟 。模型P<0. 000 1,说 模型2.1.4超声功率的选择。由图4可知，随着超声功率的增 大，总黄酮的提取率也相应增加。在超声功率达326 W时,其显著，在统计学上是 的。久C 2个因素所模拟的一次项小于0. 05,说明因变量和所选自变量之间的线性关系14安徽农业科学2020 年，该回归方程能代替试验真 分 结果。模拟的，由此可表2响应 及结果二次项B7(P<0. 01)，表明B因素对总黄酮提取率达到极显 著的

，交互项BC的P值<0.25,2

，料液比与超声功率、超声功率与提取时间、提取

Table 2 Response sprfvcr tat design and resplts与提间试验号 No.1234567891011)614151617181920212223242526272829取时间这些因素之间都存在一定的 的交互作用会对总

用,并且它

料液比Soliki liquid ratio111111111111111111111111111115757404040403040304040404030303057405740304040404040405757超声功率 提取温度提取时间总黄酮提取率Ultrpoaio Extraction Extraction TotW Cavonoid power temperature iomn extraction Wtminrate/%421830018300423003003004230018300300300423003003001818424218300300300300300迂

取率产生显著的影响。分 ，做出

2.3. 3响应面交互作用分析。通过Design-Expert & 6. 6软

件，将AC、BD、CD 面曲线图，见图6o由图6可知，当各因素在一定范围内增大时，对应的响

;但当

时，其

最高点，各因素的值继 的 取率最高。大却不断减小。等高线图的中 在3D图上的最高 ，

2.3.3优化与验证试验。依据以上响应面试验模型和结果 分析，得出最 取条件下总 取率为1.1%,料液比1：41. 2,超声功率32&8 W,提取温度63.2 t,提取时间

35. 3数穗 在此最佳条件下,4

证 5次，可得总 平均

取率平均为12.07%。实际所测得的提取率的预测

6.)%,4 模型的

高，并取以上条件进取工艺的 化 研究。，在后 中

2.3总黄酮体外抗氧化活性 根据图5能够看出，总黄酮 对• OH、O0-・、DPPH •均能够 范围内,2

的清除

除作用，并且在 浓呈现量效。当 浓度为0 m归mL左右时，对• OHO- •和DPPH•的最大清除率分19.19.19.18.181

4

2 c cc J

6656665667657766576765665667630301630130301303030630630301130303061630303061.911.821.881.37).11.741.55).61.591.92).61.471.951.811.851.911.531.821.751.841.7718. 7().0318.231.77).)).)19. 031.84UOEeJlxqo

C:提取温度Extraction temperature II °C50 l：30

A:料液比Solid-liquidratioD:提取时间Extractiontime II min10 180

B:超声功率Ultrasonic power IIWD:提取时间Extractiontime II min10 50

度Extraction temperature II °C图6各个因子交互作用的响应面图Fig. 6 Responso sarftce diarrm of each facOr inOrrction1oA0 8o 6o 4o 2o o

0.5

1.0

o11o 迂-8o

-Vc -•-总黄酮 Total flavonoids「 b14EEJ(D60OU&JEO4oO<

13112瑟20炯

1.5

2.00 0.5 1.0 1.5 2.0浓度 Concentration II mg/mLConcentration II mg/mL浓度 Concentration II mg/mL图7总黄酮对• OH(a) O5b)和DPPH - (c)的清除作用Fig. 3 Schvedginr effecO of OOt flavenXds on • OH( a) , O2- * (b) and DPPH •(c)44卷1期唐健民等 响应面法优化多穗石柯总黄酮提取工艺及抗氧化活性研究别为11. 75%、32. 00%和75. 86%。在试验浓度范围内，总黄

Vc的还原力均随浓度的

取提取法多穗石柯中的黄酮类化合物，所用时间短，要求温

，提取率好,方法简单

，具

(图0)，线性关系的优势。较好，其中2 m/mL的黄酮与0. 65 m//mL的V 几乎均等,参考文献⑴ 雷鸣多穗石柯佔物对肛常肝细胞L-^增殖作用的研究[D].遵

3结论该试验采用响应面法优化多穗石柯总黄酮的提取工艺 条件，然后在最

取条件下对其 量测定,并研究其化。结果表明，多穗石柯总黄酮提取的最优条

件为:超声功率320 8 W、超声频率35 kHz、乙醇浓度66%、料 液比1 41. 2、提取温度69. 2 t、提取时间95. 8 min,总黄酮 提取率为19. 7%；其黄酮对-OH、O2，DPPH •均能够起

除作用，当总

浓 2 m/mL时，对它们的最 、: 学院,2518•[2] 申东，赖飞姚文化，等•多穗石柯茶[J]•贵州茶叶,2001(2) ：20-24[3] 王国晖2 ，胡应祥•多穗石 及丰产栽培 [J]-湖南林业科学,22729(5) ：122-74,191.[3]陆武弟，杨仕婷,赵志文，等•多穗石柯叶提取物的急性毒性实验研究

[J].右江医学,2215,25(5) ：533-532.[3] 丰金玉，秦昱，谿春，等•超声波辅助提取多穗石柯根皮—研究[J].

中国农学通报,215,1(10) ：551-255.[6]盛云杰，赵天文,方大宽，等•响应 优化白花蛇舌草中总黄酮的提艺[J].时珍国医国药,2218,22(5)：5249-1285.，苏小，李清明，等•响应 优化淮山中总黄酮提取工艺的研究[J].中国酿造,2217,23(5) ：115-118.云龙2 ，胡俊君，等•响应面法优化苦养酒糟黄酮提取工艺的研究[J].中国酿造,221322(5) ：38-42.[6] 邓梦琴2 2 ，等•响应面法优化菠萝蜜果皮黄酮提取工艺[J].食品工业昭,2217,35(5) ：222-225.[7] 赵娟娟.分心木黄酮超声-- 及抗氧化性研究[]•食品研

究与开发,3218,32(18)：75-75.[11]: ，骆立双，刘永芳，等•超声 黄酮工艺优化及抗氧化活性研究[J].时珍国医国药,2218,32(5)；2549-1543.[7]史艳财，邹蓉2 ，等•黄花倒水莲总黄酮提取工艺研究•北方园艺,227(7):134-135.[D]: ，林洁荣2 ，等•响应面分析法优化紫象草花青素提取工艺[J].黑龙江 (秫憑)，2215(19) ：11-15.[4] 蔡碧琼.稻壳黄酮类化合物的提取、精制及抗氧化活性研究[D], 8畐:福建 学 2008：58-65•[5] 朱会霞.覆 黄酮抗氧化活性研究[[].现代食品科技22212,22

(17) ：1354-1328.除率分别为11. 75%、32. 00%和75. 86%。浓度为2 m/mL

的总黄酮与0. 05 m/mL V的吸光度几乎均等，可见其总黄

化

。通 面法优化,采用超声波提•金 黄酮对氧化损伤HUVEC保护作用的研究[D].衡:南华大学,2012：15.[15]高行恩，王洪新.9 对山药多糖含量及其体外抗氧化活性的影响[]•食品与发酵工业,2215,21(5) ；255-224.[17] :

(上接第75页)文献⑴ 何国庆2英民，丁立孝.食品微生物学[M]. 3版•北京:中国农业大学

能研究•工业微生物221525(5) ：51-33.[17]胡敏，郝林2 •枯草芽抱杆菌产细菌素发酵条件的优化[J]-食品科学,221425(9) ：78-244.[11] AN J Y,ZHU W J,LIP Y,et S Pueficayou and characterizatiou of a no­

vel bacteUocin CAMT2 pro/uced by BacUhis 口171止!询11^1心118 isolated from macne UsU Epinepheh areolatue [ J ]. Foo/ control. 2215,51:278 - O.2342217.2朱沁玲，余厲静，等•食品防腐剂 药对雌性大鼠「、肾脏及 性的研究[J]•9 学,2218,32(5) ：355-358•\"王强胜,李建芬•天 源食品防腐剂的研究进展[]•武汉学学报,221524(1):22-31.王晔2长辉华，胡民强•中草药及其 在食品防腐中的应用研究进展佛山科学技术学院学报(自然科学版),221523(1) ：5-9.f兆竹2 2 • 2 菌肽的特性及其在食品工业中的应用[]•安徽农业科学,221321(15) ：5946-5651.[6] MATARAGAS M,MELAXOPOULOUS J,DROSINOS EHA.Uou of two bacteUocins pro/eced by Leuconostcc mesenierioides L124 and Lactobacillus cuuatue L442: isolated from de feenented sausa/es [ J ]. WoUU J Microbiol Biotechnot, 2054,19(5) ：067--55.[[]KEMPERMAN R, KUIPERS A, KARSENS H,eS S. IdectiUcatiou and

characmUzayou of two novel cUstridim bacteUocins, cimolaUn A and clos- Ucin 574 [J]. Appl Edvrou Micro/,2003,66(5) ： 1589-1595.[7]陈雪2 ，陈莉，等•产细菌素芽抱杆菌的筛选及发酵条件的研究[J].中国酿造：22-32.[15]林文凭.9ddu eubthis ZJU15产生的抗菌肽研究[D].杭州:浙江大

学 2010.[9]严涛，朱建国,姜甜,等•一 芽抱杆菌的分离筛选及产鞄条件优化[J]•微生物学通报,221535⑵ ：239-246.[15]罗宝龙，魏军林,黄丽丽，等•一猪源产细菌素芽抱杆菌的筛选及抑菌

性[]•微生物学通报,221535(5)：742-1349•[17]钟小廷产细菌素蜡样芽抱杆菌的筛选、畑及其培养基优化[D].成

都:西华大学,2214：15-15•[17] CAROLISSEN-MACKAY V,ARENDSE G,HASTINGS J W, Puri/catiou

of bacteUocins of lactic acid bacteUa: Pro/Umc and pointers -J]. Intema- Uonat joumat of foo/ micmbmU/,1997,34( 1) ：1-16.[H] CHEN C Z, COOPER S L. PtemcOOTo aetweec decdUmes biocides and

bacterid memUranes [ J], BiomateUats,ZOC,23(16) :3359-3325.[[]弓曲梅，符丹丹,赵君峰，等•泡菜中抑菌性芽抱杆菌的筛选及其细菌

素理伊性•食品工业昭,2218,32( 14)：115-114219•[J]冯劲,周少璐2族东，等•产细菌素的细菌 及其产物抑菌性