微量分光光度计测定核酸浓度和纯度
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发布时间：2024-10-16 06:52
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时间：2024-10-16 11:34
微量紫外分光光度法是检测核酸纯度和含量的常用方法。DNA和RNA在260nm处有最大吸收峰，蛋白质在280nm处有最大吸收峰，盐和小分子集中在230nm处。260nm波长的吸光度能测定DNA或RNA浓度，浓度与吸光度正相关。建议先电泳检测样品，以确认是否进行纯度和浓度测定。
对于不同类型的核酸，计算浓度的方法有所不同。例如，IMPLEN的NanoPhotometer N60新产品的使用过程包括开机、选择检测模式、校准和上样。首先，使用无菌水校准仪器，确保准确性。然后，点入待测样品，进行浓度和纯度测定。
结果通过曲线和数据展示。左侧曲线表示核酸在不同波长下的吸光度，纯核酸在A230处吸光值最低，在A260处最高，在A280处吸光度为半山坡。右侧数据栏显示核酸的浓度和纯度信息。仪器会根据纯度与理想值的差异，用黄色感叹号提示问题，并给出可能原因。
评估核酸纯度时，双链DNA的A260/A280值应在1.7～1.9之间，高于此范围可能含有RNA残留，低于此范围可能有蛋白质残留。RNA的A260/A280值应在1.9～2.1之间，低于1.8可能蛋白质杂质较多，高于2.2可能RNA已降解。
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